الخلفية والهدف يعتبر الفسفرة التأكسدية في الميتوكوندريا عملية رئيسية للحصول على الطاقة في خلايا الأورام، وترتبط ارتباطًا وثيقًا بخصائص الأورام البيولوجية. يمكن للمايكروRNA (microRNA، miRNA) تنظيم إعادة برمجة أيض خلايا الأورام من خلال الارتباط مع الرنا الرسول (messenger RNA، mRNA). هدفت هذه الدراسة إلى التحقيق في آلية تنظيم miR-107 المستهدف لبروتين نظير القشرة العارية 1 (naked cuticle homolog 1، NKD1) لفسفرة التأكسد الميتوكوندرية في خلايا سرطان الثدي. الطريقة تم استخدام قاعدة بيانات TNM للكشف عن تعبير NKD1 في عينات أنسجة سرطان الثدي (n=1,095) وأنسجة مجاورة للورم (n=403) وتحليل العلاقة بين تعبير NKD1 وتوقعات المرضى؛ تم جمع عينات أنسجة سرطان الثدي والأنسجة المجاورة التي استوفت معايير الإدراج والاستبعاد من المرضى الذين تمت معاينتهم في قسم جراحة الأورام بالمستشفى الجامعي بكلية الطب في نينغشيا من يونيو 2024 إلى يونيو 2025، وتم استخدام PCR كمي في الوقت الحقيقي (qRT-PCR) وتقنية Western blot لاختبار وتأكيد تعبير NKD1 في أنسجة وسلاسل خلايا سرطان الثدي. تم بناء ناقل تثبيط NKD1 (siNKD1)، وتحليل RNA-seq لتحليل الوظائف البيولوجية ومسارات الإشارة التي ترتبط بتثبيط NKD1، والتحقق من تأثير NKD1 على مسار Wnt/β-catenin والفسفرة التأكسدية عبر Western blot. تم استخدام تحليل الشبكة المشتركة للتعبير الجيني المرجح (WGCNA) لاختيار وحدات miRNA الأساسية المرتبطة بمظاهر سرطان الثدي من قواعد بيانات TCGA وGEO؛ تم استخدام قواعد البيانات الحيوية الإلكترونية TargetScan وmiRWalk للتنبؤ بmiRNA التي ترتبط ارتباطًا عاليًا مع NKD1؛ تم التأكد من تعبير miR-107 في سرطان الثدي وتأثيره على توقع المريض باستخدام قواعد بيانات TCGA وGEO والتحليل البقائي؛ تم التحقق من العلاقة المستهدفة بين miR-107 وNKD1 عبر اختبار تقرير اللوكاز المزدوج؛ تم استخدام طريقة النقل الفوري في خلايا MDA-MB-231 لنقل miR-107 mimic وmiR-107 inhibitor بشكل منفصل، وتم قياس تعبير NKD1 ومستوى الفسفرة التأكسدية للخلايا باستخدام Western blot. تمت الموافقة على هذه الدراسة من قبل لجنة الأخلاقيات في مستشفى كلية الطب في نينغشيا (رقم: KYLL-2022-0514). النتائج أظهر تحليل قاعدة بيانات TNM مع 10 عينات أنسجة سرطان الثدي و10 عينات أنسجة مجاورة أن NKD1 يعبر عنه بمستوى منخفض في أنسجة سرطان الثدي وكان مرتبطًا ارتباطًا سلبيًا بتوقعات المرضى؛ أظهر تحليل RNA-seq أن تثبيط NKD1 يزيد بشكل ملحوظ من مسارات إشارة Wnt/β-catenin والفسفرة التأكسدية، وأظهرت نتائج Western blot أن تثبيط NKD1 يعزز تحلل Axin ويزيد من تعبير بروتينات β-catenin وGSK-3β؛ أظهر تحليل الثراء GSEA أن تثبيط NKD1 يزيد من تعبير بروتينات c-Myc وIDH2؛ تثبيط الفسفرة التأكسدية (IACS-010759) أبطأ بشكل ملحوظ نمو الخلايا، وعادت سرعة تثبيط نمو الخلايا في مجموعة siNKD1 بالمقارنة (P<0.05). أظهر تحليل WGCNA أن وحدات TCGA-ME brown وGEO-ME blue مرتبطة ارتباطًا عاليًا بمظاهر سرطان الثدي، وأظهر التحليل المشترك مع قواعد البيانات أن miR-107 هو miRNA المستهدف لـ NKD1، وكان تعبير NKD1 مرتبطًا سلبًا بتعبير miR-107. أظهرت تحليلات قاعدة البيانات تعبير miR-107 العالي في أنسجة سرطان الثدي مقارنة بالأنسجة الطبيعية وكانت مرتبطة مع توقعات المرضى السيئة (P<0.05). أكد اختبار تقرير اللوكاز المزدوج أن miR-107 يستهدف مباشرة جين NKD1، وكان تعبير miR-107 مرتبطًا سلبًا بتعبير NKD1. مقارنةً بمجموعة التحكم، أثرت مجموعة miR-107 inhibitor المنفردة على انخفاض مستوى الفسفرة التأكسدية في الخلايا، لكن مستوى الفسفرة التأكسدية تعود جزئيًا في المجموعة المشتركة miR-107 inhibitor وsiNKD1 (P<0.05). الخلاصة يعزز miR-107 فسفرة التأكسد الميتوكوندرية في خلايا سرطان الثدي عن طريق تثبيط NKD1 المستهدف وتنشيط مسار الإشارة Wnt/β-catenin.

الفسفرة التأكسدية;miR-107;NKD1;سرطان الثدي;مسار إشارة Wnt/β-catenin