دراسة تجريبية عن تعزيز DMRT1 لتكاثر خلايا سرطان غدة الرئة وتكوين الأورام في الجسم الحي
摘要
الخلفية والهدف معدل الإصابة والوفاة بسرطان غدة الرئة مرتفع جدًا، مما يشكل تهديدًا خطيرًا لصحة الإنسان. يرتبط عامل النسخ المرتبط بالمزدوجة وmab-3 (DMRT1) بأنواع متعددة من الأورام. تهدف هذه الدراسة إلى تحليل تعبير DMRT1 في سرطان غدة الرئة وتأثيره على سوء بقاء المرضى، وكذلك استكشاف دوره وآلياته في خلايا سرطان غدة الرئة. الطريقة استخدمت بيانات عينة سرطان غدة الرئة من قاعدة بيانات أطلس الجينوم السرطاني (TCGA) لتحليل تعبير DMRT1 في أنسجة سرطان غدة الرئة وعلاقته ببقاء المرضى. باستخدام تقنية RNA قصير الشريط (shRNA) تم بناء خطوط خلايا A549 وPC9 ذات تثبيط DMRT1 (shRNA#1 و shRNA#2) بالإضافة إلى ضوابط سلبية، وكذلك بناء خط خلايا A549 المعبر عن DMRT1 بشكل زائد (OE-DMRT1). باستخدام نظام IncuCyte™ لتحليل الخلايا الحية، تم رصد تكاثر الخلايا لمدة 72 ساعة، وتقييم قدرة تكوين المستعمرات لمدة 14 يومًا، واختبار EdU لتقييم مستوى تخليق الحمض النووي لمدة ساعتين، وتحليل دورة الخلية ومستوى الاستماتة باستخدام تقنية التدفق الخلوي. أُجريت تجارب على فئران عارية BALB/c لمراقبة تأثير DMRT1 على تكوين الأورام في الجسم الحي. باستخدام تقنيات تسلسل النسخ (RNA-seq) تم استكشاف المسارات الإشارية التي ينظمها DMRT1 في تكاثر خلايا سرطان غدة الرئة، وتم تحليل تأثير التعبير على جينات دورة الخلية والapoptosis باستخدام PCR الكمي التتابعي الغشائي و Western blot. تم تحليل البيانات باستخدام برنامج GraphPad Prism 10.0. تمت الموافقة على الدراسة من قبل لجنة أخلاقيات الحيوان بمستشفى الجمعية الطبية بجامعة شنغهاي جياو تونغ التاسع (SH9H-2023-A871-1). النتائج أظهرت تحليلات قاعدة بيانات TCGA تعبيرًا مرتفعًا غير طبيعي لـ DMRT1 في سرطان غدة الرئة وارتباطًا سلبيًا بين مستوى التعبير وبقاء المرضى. أدت تثبيط DMRT1 إلى قمع كبير في تكاثر الخلايا وقدرة تكوين المستعمرات وتخليق الحمض النووي (P < 0.001)، في حين أدت زيادة التعبير إلى تعزيز تكاثر خلايا A549 (P < 0.05). كما تسبب تثبيط DMRT1 في توقف دورة الخلية في مرحلة G0/G1 (P < 0.001) وتحفيز الاستماتة (P < 0.001). أكدت تجارب تكوين الأورام في الفئران العارية أن تثبيط DMRT1 يبطئ معدل تكاثر خلايا سرطان غدة الرئة في الجسم الحي (P < 0.01). أدى تثبيط DMRT1 إلى انخفاض التعبير في جينات دورة الخلية المرتبطة بمرحلة G1/S مثل عامل النسخ E2F1، وتأثيرات جينات السرطان MYC، والسيكلين E2 (CCNE2) والدورة الخلوية CDC6، دون تغيير واضح في البروتين Rb الكلي، مع انخفاض في مستوى الفسفرة pRb (Ser807/811)؛ كما انخفض التعبير في البروتين المقاوم للاستمواتة Bcl-2، في حين ارتفعت نسبة Bax/Bcl-2، بالإضافة إلى ارتفاع مستويات caspase-3 المشطر وPARP المشطر. الاستنتاج يرتبط التعبير العالي لـ DMRT1 بسوء التوقع في مرضى سرطان غدة الرئة، ومن المحتمل أن يعزز تكاثر الخلايا من خلال تعزيز تقدّم دورة الخلية المتوسطة بـ E2F وتنشيط مسار الاستماتة عبر caspase-3، مما يزيد من نشاط تكاثر خلايا سرطان غدة الرئة.
关键词
مستضد السرطان-الخصية;عامل النسخ المرتبط بالمزدوجة وmab-3;سرطان غدة الرئة;تكاثر الخلايا;الاستماتة
以上内容由讯飞翻译自动生成，翻译内容仅供参考。对于因使用本网站翻译内容产生的相关后果，本网站不承担任何商业和法律责任。
The above content is generated by Large Model Translation. The translated content is for reference only. We do not assume any commercial or legal responsibilty for any consequences arising from the use of our website