دراسة آلية تنظيم EIF4A3/USP5 لاستقرار PTK2 عبر إزالة اليوبكويتين ودوره في تعزيز تكاثر وهجرة خلايا سرطان بطانة الرحم والعلاقة السريرية المرضية
摘要
الخلفية والهدف يهدد سرطان بطانة الرحم صحة النساء بشكل خطير، حيث تزداد معدلات الإصابة والوفاة سنويًا مع اتجاه نحو الشباب. تلعب كيناز التيروسين البروتيني 2 (protein tyrosine kinase 2، PTK2) دورًا كعامل محرك للأورام، ويرتبط تنشيطه غير الطبيعي بخطورة الورم، ومع ذلك فإن آلية عمل PTK2 في سرطان بطانة الرحم غير واضحة حتى الآن. تهدف هذه الدراسة إلى استكشاف تعبير PTK2 في سرطان بطانة الرحم، وأهميته السريرية، وآلية تنظيمه العلوية. الطريقة تم اختيار عينات من أنسجة الورم والأنسجة المحيطة به من خزانات العينات البيولوجية في مستشفى الأورام التابع لجامعة شاندشي الطبية التي أجرت جراحة استئصال سرطان بطانة الرحم خلال الفترة من يناير 2021 إلى ديسمبر 2021. تم استخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل الفوري الكمي العكسي (real-time quantitative reverse transcription polymerase chain reaction، RT-qPCR) للكشف عن مستوى mRNA الخاص بـ PTK2 وتحليل علاقته مع الخصائص السريرية المرضية للمرضى. حصلت الدراسة على موافقة لجنة الأخلاقيات بمستشفى الأورام التابع لجامعة شاندشي الطبية (JC2024036). تم قياس تعبير PTK2 في خلايا سرطان بطانة الرحم باستخدام RT-qPCR وتقنية التحليل البروتيني Western blot. تم تحليل تعبير PTK2 وعلاقته بتنبؤات المرضى باستخدام قاعدة بيانات TIMER وبروتيوم الإنسان (The Human Protein Atlas، HPA). تم بناء نموذج تثبيط PTK2 وتم تقييم تأثيره على تكاثر وهجرة الخلايا باستخدام كيت العد الخلوي 8 (cell counting kit-8، CCK-8) وتجارب transwell. استخدمت قاعدة بيانات التفاعلات بين ناقلات إزالة اليوبكويتين Ubibrowser للتنبؤ بنواقل إزالة اليوبكويتين المحتملة لـ PTK2، وتم اختيار ناقل الببتيد الخاص باليوبيكويتين 5 (ubiquitin-specific peptidase 5، USP5) باستخدام قواعد بيانات TIMER و GEPIA لتحليل العلاقة بينه وبين تعبير PTK2. تم بناء نموذج تثبيط USP5 ومعالجة الخلايا بمثبط البروتيياز MG132 لتحليل تغير تعبير PTK2، وتم تأكيد تنظيم USP5 لـ PTK2 باستخدام اختبارات الترسيب المناعي المشترك (co-immunoprecipitation، Co-IP)، وتم التحقق من تأثير USP5 عبر PTK2 على نمو وهجرة خلايا سرطان بطانة الرحم من خلال تجارب استعادة الوظيفة. بالإضافة إلى ذلك، تم اختيار عامل بدء الترجمة EIF4A3 من خلال قاعدة بيانات ENCORI وتحليل علاقته بتعبير USP5. تم بناء نماذج تثبيط وزيادة تعبير EIF4A3 مع معالجة بالدواء actinomycin D لتقييم تأثيره التنظيمي على USP5. النتائج شملت الدراسة 29 مريضة، حيث لوحظ تعبير مرتفع لـ PTK2 في أنسجة الورم والخلايا (P<0.05)، وكان مرتبطًا بقصر فترة بقاء المرضى (منحنى log-rank P<0.05). تثبيط PTK2 قمع تكاثر وهجرة خلايا سرطان بطانة الرحم (P<0.05). وتحليل العلاقة أظهر ارتباطًا إيجابيًا بين USP5 وPTK2 (P<0.05)، وتثبيط USP5 لم يؤثر على التعبير mRNA لكنه خفض مستوى البروتين (P<0.05)، وتأثيره تم عكسه بواسطة MG132؛ وأكد اختبار Co-IP أن تثبيط USP5 زاد من مستوى يوبكويتين PTK2. أظهرت تجارب استعادة الوظيفة أن زيادة تعبير USP5 رفعت PTK2 وعززت التكاثر والهجرة، وتثبيط PTK2 عكس هذا التأثير (P<0.05)؛ أما التثبيط العكسي لـ USP5 خفض PTK2 وكبت التكاثر والهجرة، وزيادة تعبير PTK2 قلبت التأثير (P<0.05). ربط البروتين RNA EIF4A3 تفاعل مع USP5 وأظهر تعبيرًا إيجابيًا. أظهرت تجربة actinomycin D أن EIF4A3 يزيد من نصف عمر mRNA الخاص بـ USP5 (P<0.05)، وأكد Western blot تنظيمه الإيجابي لمستوى البروتين (P<0.05). الخلاصة يعبر PTK2 عن مستوى مرتفع في سرطان بطانة الرحم ويرتبط بسوء توقعات المرضى، ويعتبر الجزيء الفرعي الحاسم لتنفيذ وظيفة USP5 المسببة للسرطان. علاوة على ذلك، ينظم EIF4A3 تعبير USP5 عن طريق زيادة استقرار mRNA. توضح الدراسة دور محور EIF4A3/USP5/PTK2 في سرطان بطانة الرحم وتوفر هدفًا جديدًا للعلاج الجزيئي المستهدف.
关键词
سرطان بطانة الرحم;PTK2;USP5;EIF4A3;تكاثر الخلايا;هجرة الخلايا
以上内容由讯飞翻译自动生成，翻译内容仅供参考。对于因使用本网站翻译内容产生的相关后果，本网站不承担任何商业和法律责任。
The above content is generated by Large Model Translation. The translated content is for reference only. We do not assume any commercial or legal responsibilty for any consequences arising from the use of our website