Wirkmechanismus serumabgeleiteter Exosomen, die miR-143-3p tragen, in der gezielten Regulation von BPTF und deren Einfluss auf das maligne Fortschreiten von Magenkrebs

QUAN Zhenhao ,  

LIN Lin ,  

XU Feipeng ,  

HUANG Renwei ,  

CHEN Rihong ,  

SUN Kaiyu ,  

摘要

Hintergrund und Zweck: miR-143-3p kann die Proliferation, Invasion, Migration, den Zellzyklus und den epithelial-mesenchymalen Übergang von Magenkrebszellen hemmen. BPTF als ein Onkogen ist im Magenkrebs hoch exprimiert und mit einer schlechten Prognose der Patienten verbunden. Exosome, extrazelluläre Vesikel mit einer Lipiddoppelschicht, die von verschiedenen Zellen freigesetzt werden, tragen miRNA und können eine tumorunterdrückende Rolle bei der Entstehung und Entwicklung von Magenkrebs spielen. Es ist jedoch bisher unklar, ob serumabgeleitete Exosomen, die miR-143-3p tragen, durch gezielte Regulation von BPTF den malignen Fortschritt von Magenkrebs beeinflussen können. Ziel dieser Studie ist es, den Wirkmechanismus der serumabgeleiteten Exosomen, die miR-143-3p tragen, bei der gezielten Regulation von BPTF und deren Einfluss auf den malignen Fortschritt von Magenkrebs zu untersuchen. Methoden: Die Expression von miR-143-3p und BPTF in Magenkrebsgewebe und den humanen Magenkrebszelllinien MKN-45, HGC-27, MGC-803 wurde durch quantitative reaktive Transkriptionspolymerase-Kettenreaktion (qRT-PCR) gemessen. Exosomen wurden aus dem Serum von Magenkrebspatienten und gesunden Freiwilligen isoliert und charakterisiert, und eine Aufnahmeexperiment mit MGC-803-Zellen wurde durchgeführt. Die gezielte Regulation von BPTF durch serumabgeleitete Exosomen, die miR-143-3p tragen, wurde mittels Western Blot und doppeltem Luciferase-Reporter-Assay überprüft. MGC-803-Zellen wurden zufällig in Normalgruppe, Exo-miR-143-3p-Gruppe, siRNA-NC-Gruppe, si-BPTF-Gruppe, Exo-miR-143-3p+pcDNA-Gruppe und Exo-miR-143-3p+pcDNA-BPTF-Gruppe eingeteilt. Nach Interventionen mit serumabgeleiteten Exosomen, die miR-143-3p tragen, negativem Kontroll-siRNA von BPTF, leerem siRNA-Plasmid von BPTF und BPTF-Überexpressionsplasmid wurden qRT-PCR und Western Blot zur Erfassung der BPTF-Expression durchgeführt. Zellapoptose, Invasion, Migration und Proliferationsgrad wurden mittels Durchflusszytometrie, Transwell und Zellzählkit-8 (CCK-8) analysiert. Ein subkutanes Xenotransplantatmodell wurde durch subkutane Injektion von MGC-803-Zellen in BALB/c-nackte Mäuse erstellt, und Tumorgewicht sowie -volumen wurden nach gleichen Gruppierungen und Interventionen gemessen. Ergebnisse: Im Vergleich zu den gepaarten parakankären Geweben war die Expression von miR-143-3p im Magenkrebsgewebe signifikant erniedrigt (P<0,05), während die Expression von BPTF-mRNA signifikant erhöht war (P<0,05). Im Vergleich zu GES-1-Zellen war die Expression von miR-143-3p in MKN-45-, HGC-27- und MGC-803-Zellen signifikant erniedrigt (P<0,05), die Expression von BPTF-mRNA war signifikant erhöht (P<0,05). Die Studie konnte serumabgeleitete Exosomen erfolgreich extrahieren. Serumabgeleitete Exosomen konnten erfolgreich von MGC-803-Zellen aufgenommen werden, und serumabgeleitete Exosomen von gesunden Freiwilligen konnten die Expression von miR-143-3p in MGC-803-Zellen erhöhen. Serumabgeleitete Exosomen, die miR-143-3p tragen, können BPTF gezielt regulieren. Im Vergleich zur Normalgruppe zeigten die Gruppen Exo-miR-143-3p, si-BPTF und Exo-miR-143-3p+pcDNA eine signifikant niedrigere relative Expression von BPTF, verringerte Anzahl an Invasionen und Migrationen, reduzierte Zellaktivität, geringeres subkutanes Tumorgewicht und Volumen bei Mäusen (P<0,05) sowie eine erhöhte Apoptoserate (P<0,05). Im Vergleich zur Exo-miR-143-3p-Gruppe zeigten die Gruppe Exo-miR-143-3p+pcDNA-BPTF eine signifikant höhere relative Expression von BPTF, eine höhere Anzahl an Invasionen und Migrationen, eine höhere Zellaktivität, höheres Tumorgewicht und -volumen bei Mäusen (P<0,05) sowie eine verringerte Apoptoserate (P<0,05). Schlussfolgerung: Serumabgeleitete Exosomen, die miR-143-3p tragen, können BPTF gezielt herunterregulieren und dadurch das maligne Fortschreiten von Magenkrebs hemmen.

关键词

serumabgeleitete Exosomen; miR-143-3p; gezielte Regulation; BPTF; Magenkrebs; malignes Fortschreiten

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