Contexte et objectifs Le cancer de l'endomètre menace gravement la santé des femmes, avec une incidence et une mortalité en augmentation annuelle ainsi qu'une tendance à la jeunesse. La protéine tyrosine kinase 2 (protein tyrosine kinase 2, PTK2) est un facteur moteur tumoral dont l'activation anormale est liée à la malignité tumorale, mais le mécanisme d’action de PTK2 dans le cancer de l'endomètre reste inconnu. Cette étude vise à examiner l'expression de PTK2 dans le cancer de l'endomètre, sa signification clinique et son mécanisme de régulation en amont. Méthodes Les échantillons de tissu tumoral et de tissu adjacent cancéreux ont été sélectionnés dans la biobanque du Centre oncologique affilié à l'Université médicale de Shanxi, provenant de patientes ayant subi une résection chirurgicale du cancer de l’endomètre entre janvier 2021 et décembre 2021. Le niveau d'ARNm de PTK2 a été détecté par RT-qPCR (real-time quantitative reverse transcription polymerase chain reaction) et son lien avec les caractéristiques clinico-pathologiques des patientes analysé. L’étude a reçu l'approbation du comité d'éthique du Centre oncologique affilié à l'Université médicale de Shanxi (JC2024036). L'expression de PTK2 dans les cellules du cancer de l'endomètre a été mesurée par RT-qPCR et Western blot. L’expression de PTK2 et sa corrélation avec le pronostic des patientes ont été analysées à l’aide des bases de données TIMER et The Human Protein Atlas (HPA). Un modèle d’inhibition de PTK2 a été construit et son effet sur la prolifération et la migration cellulaires évalué via le test CCK-8 et des expériences transwell. La base de données Ubibrowser a permis de prédire les désubiquitinisases potentielles de PTK2. En combinant TIMER et GEPIA, la peptidase spécifique à l’ubiquitine 5 (ubiquitin-specific peptidase 5, USP5) a été identifiée et son lien avec l’expression de PTK2 analysé. Un modèle de Knockdown de USP5 a été construit, les cellules ont été traitées par l’inhibiteur 26S MG132, et les variations d'expression de PTK2 observées. La régulation de PTK2 par USP5 a été validée par co-immunoprécipitation (Co-IP). Les expériences de restauration fonctionnelle ont confirmé si USP5 affectait la prolifération et la migration des cellules du cancer de l'endomètre via PTK2. Par ailleurs, EIF4A3 (eukaryotic translation initiation factor 4A3) a été identifié via la base ENCORI et sa corrélation avec l’expression de USP5 analysée. Des modèles d’inhibition et de surexpression d’EIF4A3 avec traitement à l’actinomycine D ont permis d’évaluer son effet régulateur sur USP5. Résultats Vingt-neuf patientes incluses; PTK2 surexprimé dans les tissus tumoraux et cellulaires (P < 0.05), associé à une réduction de la survie globale (log-rank P < 0.05). Le knockdown de PTK2 inhibait la prolifération et la migration des cellules du cancer de l’endomètre (P < 0.05). USP5 et PTK2 étaient positivement corrélés (P < 0.05). Le knockdown de USP5 ne modifiait pas l’ARNm de PTK2 mais diminuait son niveau protéique (P < 0.05), effet inversé par MG132. Co-IP confirmait que le knockdown de USP5 augmentait l’ubiquitination de PTK2. Les expériences de restauration montraient que la surexpression d’USP5 augmentait PTK2 et favorisait la prolifération et la migration, et que le knockdown de PTK2 inversait cet effet (P < 0.05). Inversement, le knockdown d’USP5 diminuait PTK2 et freinait la prolifération et la migration, la surexpression de PTK2 inversait cette inhibition (P < 0.05). EIF4A3 interagit avec USP5 et leur expression est positivement corrélée. L’expérience à l’actinomycine D montrait qu’EIF4A3 prolongeait la demi-vie de l’ARNm USP5 (P < 0.05), Western blot confirmant la régulation positive d’EIF4A3 sur le niveau protéique d’USP5 (P < 0.05). Conclusion PTK2 est surexprimé dans le cancer de l’endomètre et lié à un mauvais pronostic, constituant une molécule clé médiant l’effet oncogénique de USP5. EIF4A3 régule positivement USP5 via la stabilisation de son ARNm. Cette étude révèle le rôle de l’axe de signalisation EIF4A3/USP5/PTK2 dans le cancer de l’endomètre et propose une nouvelle cible pour la thérapie moléculaire ciblée.

cancer de l’endomètre;PTK2;USP5;EIF4A3;prolifération cellulaire;migration cellulaire