배경 및 목적: miR-143-3p는 위암 세포의 증식, 침습, 이동, 세포 주기 및 상피-간엽 전이를 억제할 수 있다. BPTF는 암 유전자로서 위암에서 과발현되며 환자의 불량 예후와 관련이 있다. 엑소좀은 다양한 세포에서 분비되는 지질 이중층 구조의 외포로, miRNA를 운반하여 위암 발생 및 진행에 종양 억제 역할을 할 수 있다. 그러나 혈청 유래 엑소좀이 miR-143-3p를 운반하여 BPTF를 표적으로 조절하여 위암의 악성 진행에 영향을 미치는지 여부는 아직 명확하지 않다. 본 연구는 혈청 유래 엑소좀이 miR-143-3p를 운반하여 BPTF를 표적으로 조절하여 위암 악성 진행에 미치는 작용 기전을 탐구하는 것을 목적으로 한다. 방법: 실시간 형광 정량 역전사 중합효소 연쇄반응(qRT-PCR)을 사용하여 위암 조직 및 인간 위암 세포주 MKN-45, HGC-27, MGC-803에서 miR-143-3p 및 BPTF의 발현을 측정하였다. 위암 환자와 건강한 자원봉사자의 혈청에서 엑소좀을 추출 및 확인하고 MGC-803 세포 흡수 실험을 수행하였다. 단백질 면역검정(Western blot) 및 이중 루시퍼레이스 리포터 유전자 실험을 통해 혈청 유래 엑소좀이 운반하는 miR-143-3p가 BPTF를 표적으로 조절하는 작용을 검증하였다. MGC-803 세포를 정상군, Exo-miR-143-3p군, siRNA-NC군, si-BPTF군, Exo-miR-143-3p+pcDNA군, Exo-miR-143-3p+pcDNA-BPTF군으로 무작위 분류하고 혈청 유래 엑소좀이 운반하는 miR-143-3p, BPTF siRNA 음성 대조군, BPTF siRNA 무장 플라스미드, BPTF 과발현 플라스미드로 군별 중재 후 qRT-PCR 및 Western blot 실험으로 BPTF 발현을 측정하였다. 유세포 분석, 트랜스웰 및 세포 계산 키트-8(CCK-8) 실험을 통해 세포 사멸, 침습, 이동 및 증식 정도를 평가하였다. MGC-803 세포를 피하 접종하여 BALB/c 누드 마우스 이식종 모델을 구축하고 동일한 군 및 중재 방법으로 누드 마우스의 피하 종양 무게와 부피를 측정하였다. 결과: 짝을 이룬 암 주변 조직과 비교하여 위암 조직에서 miR-143-3p의 발현이 유의하게 낮았고(P<0.05), BPTF mRNA 발현이 유의하게 상승하였다(P<0.05). GES-1 세포와 비교하여 MKN-45, HGC-27, MGC-803 세포에서 miR-143-3p 발현이 유의하게 감소하였고(P<0.05), BPTF mRNA 발현이 유의하게 증가하였다(P<0.05). 본 연구에서는 혈청 유래 엑소좀을 성공적으로 추출하였다. 혈청 유래 엑소좀은 MGC-803 세포에 성공적으로 흡수되었으며 건강한 자원봉사자 혈청 유래 엑소좀은 MGC-803 세포 내 miR-143-3p 발현을 상향 조절할 수 있었다. 혈청 유래 엑소좀이 운반하는 miR-143-3p는 BPTF를 표적으로 조절할 수 있었다. 정상군과 비교하여 Exo-miR-143-3p군, si-BPTF군, Exo-miR-143-3p+pcDNA군에서는 BPTF의 상대 발현, 침습 수, 이동 수, 세포 활성도, 누드 마우스 피하 종양 무게 및 부피가 유의하게 감소하였고(P<0.05), 세포 사멸률은 유의하게 증가하였다(P<0.05). Exo-miR-143-3p군과 비교하여 Exo-miR-143-3p+pcDNA-BPTF군에서는 BPTF의 상대 발현, 침습 수, 이동 수, 세포 활성도, 누드 마우스 피하 종양 무게 및 부피가 유의하게 증가하였고(P<0.05), 세포 사멸률은 유의하게 감소하였다(P<0.05). 결론: 혈청 유래 엑소좀이 운반하는 miR-143-3p는 BPTF를 표적으로 하여 발현을 하향 조절함으로써 위암 악성 진행을 억제할 수 있다.

혈청 유래 엑소좀;miR-143-3p;표적 조절;BPTF;위암;악성 진행