Фон и цель: miR-143-3p способен подавлять пролиферацию, инвазию, миграцию, клеточный цикл и эпителиально-мезенхимальный переход клеток рака желудка. BPTF как онкоген, высоко экспрессируется в раке желудка и связан с плохим прогнозом пациентов. Экзосомы, представляющие собой внеклеточные пузырьки с липидным двухслойным мембраной, выделяемые различными клетками, переносят микроРНК и могут играть противоопухолевую роль в возникновении и развитии рака желудка. Однако до сих пор неясно, могут ли экзосомы сыворотки крови, несущие miR-143-3p, влиять на злокачественное прогрессирование рака желудка путем таргетной регуляции BPTF. Цель исследования — изучить механизм действия экзосом сыворотки крови, переносящих miR-143-3p, в таргетной регуляции BPTF и их влияние на злокачественное прогрессирование рака желудка. Методы: экспрессия miR-143-3p и BPTF в тканях рака желудка и клеточных линиях рака желудка человека MKN-45, HGC-27, MGC-803 определялась методом количественной обратной транскрипции с ПЦР (qRT-PCR). Были выделены и охарактеризованы экзосомы из сыворотки больных раком желудка и здоровых доноров, а также проведен эксперимент поглощения экзосом клетками MGC-803. Методом вестерн-блоттинга и двойного люциферазного репортерного анализа подтверждена таргетная регуляция BPTF экзосомами сыворотки, несущими miR-143-3p. Клетки MGC-803 случайным образом разделяли на контрольную группу, группу Exo-miR-143-3p, siRNA-NC, si-BPTF, Exo-miR-143-3p+pcDNA и Exo-miR-143-3p+pcDNA-BPTF; после вмешательств с использованием экзосом с miR-143-3p, отрицательным контролем siRNA BPTF, пустым плазмидом siRNA BPTF и плазмидом с сверхэкспрессией BPTF проводили qRT-PCR и вестерн-блот для оценки экспрессии BPTF. Апоптоз, инвазию, миграцию и пролиферацию клеток оценивали с помощью проточной цитометрии, трансвелл и набора реагентов для подсчета клеток-8 (CCK-8). Модель трансплантации опухоли под кожу балб/ч голых мышей создавали путем подкожного введения клеток MGC-803, после чего измеряли вес и объем опухолей при тех же группах и вмешательствах. Результаты: по сравнению с соответствующими паракарциональными тканями, экспрессия miR-143-3p была значительно снижена в тканях рака желудка (P<0,05), а экспрессия BPTF mRNA значительно повышена (P<0,05). По сравнению с клетками GES-1 экспрессия miR-143-3p в клетках MKN-45, HGC-27 и MGC-803 была значительно снижена (P<0,05), а экспрессия BPTF mRNA — значительно повышена (P<0,05). В ходе исследования успешно выделены экзосомы из сыворотки. Экзосомы из сыворотки успешно поглощались клетками MGC-803, а экзосомы сыворотки здоровых доноров увеличивали экспрессию miR-143-3p в клетках MGC-803. Экзосомы, несущие miR-143-3p, таргетно регулировали BPTF. В группе Exo-miR-143-3p, si-BPTF и Exo-miR-143-3p+pcDNA показатели относительной экспрессии BPTF, количество инвазий, миграций, клеточная активность, вес и объем опухоли под кожей мышей были значительно ниже (P<0,05), а уровень апоптоза значительно выше (P<0,05) по сравнению с нормальной группой. В группе Exo-miR-143-3p+pcDNA-BPTF эти показатели были значительно выше (P<0,05), а уровень апоптоза — ниже (P<0,05) по сравнению с группой Exo-miR-143-3p. Заключение: экзосомы сыворотки, переносящие miR-143-3p, могут таргетно снижать экспрессию BPTF и подавлять злокачественное прогрессирование рака желудка.

экзосомы сыворотки; miR-143-3p; таргетная регуляция; BPTF; рак желудка; злокачественное прогрессирование