Фон и цель: заболеваемость и смертность от аденокарциномы легких остаются высокими и серьезно угрожают здоровью человека. Транскрипционный фактор, связанный с double-sex и mab-3 (DMRT1), ассоциирован с различными опухолями. Цель исследования — проанализировать экспрессию DMRT1 в аденокарциноме легких и его влияние на неблагоприятный прогноз пациентов, а также изучить его роль и механизмы в клетках аденокарциномы легких. Методы: использованы данные образцов аденокарциномы легких из базы данных The Cancer Genome Atlas (TCGA) для анализа экспрессии DMRT1 в тканях и корреляции с выживаемостью пациентов. Технология коротких штыревых РНК (shRNA) применялась для создания клеточных линий A549 и PC9 с нокдауном DMRT1 (shRNA#1 и shRNA#2) и отрицательным контролем, а также линий A549 с сверхэкспрессией DMRT1 (OE-DMRT1). Система IncuCyte™ использовалась для непрерывного мониторинга пролиферации клеток в течение 72 часов, определения способности к колонизации за 14 дней, оценки синтеза ДНК методом окрашивания EdU на 2 часа, а также анализа распределения клеточного цикла и апоптоза методом проточной цитометрии. Внутри организма на обнаженных мышах BALB/c оценивали влияние DMRT1 на опухолеобразование. Транскриптомное секвенирование (RNA-seq) использовали для исследования сигнальных путей, регулируемых DMRT1 в пролиферации клеток аденокарциномы, а количественная ПЦР (RTFQ-PCR) и Western blot — для анализа влияния на гены клеточного цикла и апоптоза. Данные анализировались программой GraphPad Prism 10.0. Исследование одобрено этическим комитетом по использованию животных Шанхайской медицинской школы, 9-й народной больницы (SH9H-2023-A871-1). Результаты: анализ базы TCGA показал аномально высокую экспрессию DMRT1 в аденокарциноме легких и отрицательную корреляцию его уровня с выживаемостью пациентов. Нокдаун DMRT1 существенно подавил пролиферацию клеток, колониеобразование и синтез ДНК (P < 0.001), тогда как сверхэкспрессия способствовала пролиферации клеток A549 (P < 0.05). Нокдаун DMRT1 вызвал блокаду клеточного цикла в фазе G0/G1 (P < 0.001) и индуцировал апоптоз (P < 0.001). Опухолеобразование на мышах подтвердило, что нокдаун DMRT1 замедляет рост опухоли in vivo (P < 0.01). Нокдаун снижал экспрессию генов, связанных с фазой G1/S — фактора транскрипции E2F1, онкогена MYC, цикллина E2 (CCNE2) и CDC6; общий уровень белка Rb не менялся, а уровень фосфорилированного pRb (Ser807/811) снижался; одновременно уменьшалась экспрессия антиапоптотического белка Bcl-2, повышались соотношение Bax/Bcl-2, а также уровни расщеплённого caspase-3 и PARP. Заключение: высокая экспрессия DMRT1 связана с неблагоприятным прогнозом у пациентов с аденокарциномой легких, вероятно, за счёт содействия прогрессированию клеточного цикла, опосредованному E2F, и активации апоптотического пути caspase-3, что усиливает пролиферативную активность клеток опухоли.

Раково-тестикулярный антиген; транскрипционный фактор, связанный с double-sex и mab-3; аденокарцинома легких; пролиферация клеток; апоптоз