Фон и цель Рак эндометрия значительно угрожает здоровью женщин, при этом уровень заболеваемости и смертности ежегодно растет, а заболевание становится моложе. Протеинкиназа тирозина 2 (protein tyrosine kinase 2, PTK2) является драйвером опухоли, и ее аномальная активация связана со степенью злокачественности опухоли, однако механизмы действия PTK2 при раке эндометрия остаются неясными. Цель данного исследования — изучить экспрессию PTK2 в раке эндометрия, ее клиническое значение и вышестоящие регуляторные механизмы. Методы Были отобраны образцы опухолевой ткани и окружающей раковой ткани пациентов с раком эндометрия, прошедших хирургическое удаление в госпитале онкологии, аффилированном с Шаньси медицинским университетом, в период с января 2021 по декабрь 2021 года. Уровень мРНК PTK2 изучали методом количественной обратной транскрипционной полимеразной цепной реакции в реальном времени (RT-qPCR) и анализировали его связь с клиническо-патологическими характеристиками пациентов. Исследование одобрено этическим комитетом госпиталя (JC2024036). Экспрессию PTK2 в клетках рака эндометрия оценивали методом RT-qPCR и вестерн-блоттинга. Анализ экспрессии PTK2 и ее связи с прогнозом пациентов проведен на базе данных TIMER и The Human Protein Atlas (HPA). Создана модель снижения экспрессии PTK2, и влияние на пролиферацию и миграцию клеток оценивали с помощью kit cell counting kit-8 (CCK-8) и экспериментов transwell. Потенциальные деубиквитинирующие ферменты PTK2 прогнозировались с помощью базы Ubibrowser, а Ubiquitin-specific peptidase 5 (USP5) выбран с использованием баз TIMER и The Gene Expression Profiling Interactive Analysis (GEPIA) для анализа корреляции с экспрессией PTK2. Создана модель снижения экспрессии USP5, клетки обрабатывались ингибитором протеасомы MG132, анализировались изменения экспрессии PTK2; взаимодействие USP5 с PTK2 подтверждено коиммунопреципитацией (Co-IP); функциональные эксперименты восстановления подтвердили влияние USP5 на пролиферацию и миграцию клеток рака эндометрия через PTK2. В дополнение, из базы The Encyclopedia of RNA Interactomes (ENCORI) был выбран EIF4A3 и проанализировано его взаимодействие с экспрессией USP5. Созданы модели снижения и сверхэкспрессии EIF4A3 с обработкой актиномицином D для оценки регуляторного воздействия на USP5. Результаты В исследование вошли 29 пациентов, PTK2 был гиперэкспрессирован в опухолевых образцах и клетках (P<0.05), и это коррелировало с ухудшением общей выживаемости пациентов (log-rank P<0.05). Снижение PTK2 подавляло пролиферацию и миграцию клеток рака эндометрия (P<0.05). USP5 положительно коррелировал с PTK2 (P<0.05), снижение USP5 не влияло на мРНК, но снижало уровень белка (P<0.05), эффект обратим с помощью MG132; Co-IP подтвердил, что снижение USP5 увеличивает уровень убиквитинирования PTK2. Восстановительные эксперименты показали, что сверхэкспрессия USP5 повышает PTK2 и способствует пролиферации и миграции, снижение PTK2 обратимо это влияет (P<0.05); наоборот, снижение USP5 снижает PTK2 и ингибирует пролиферацию и миграцию, сверхэкспрессия PTK2 обращает эффект (P<0.05). РНК-связывающий белок EIF4A3 взаимодействует с USP5 и положительно коррелирует с его экспрессией. Эксперименты с актиномицином D показали, что EIF4A3 удлиняет половину жизни мРНК USP5 (P<0.05), вестерн-блоттинг подтвердил положительную регуляцию уровня белка USP5 (P<0.05). Заключение PTK2 гиперэкспрессирован в раке эндометрия и ассоциируется с плохим прогнозом пациентов, являясь ключевым молекулярным субстратом для онкогенной функции USP5. EIF4A3 положительно регулирует экспрессию USP5 путем стабилизации мРНК. Исследование выявляет роль сигнального пути EIF4A3/USP5/PTK2 в раке эндометрия и предлагает новый таргет для молекулярной таргетной терапии.

рак эндометрия;PTK2;USP5;EIF4A3;пролиферация клеток;миграция клеток