Antecedentes y objetivo El cáncer de endometrio amenaza gravemente la salud de las mujeres, con una incidencia y mortalidad que aumentan anualmente y una tendencia hacia la juventud. La proteína tirosina quinasa 2 (protein tyrosine kinase 2, PTK2) es un factor impulsor tumoral cuya activación anormal se relaciona con el grado de malignidad del tumor, sin embargo, el mecanismo de acción de PTK2 en el cáncer de endometrio aún no está claro. Este estudio tiene como objetivo investigar la expresión de PTK2 en el cáncer de endometrio, su significado clínico y el mecanismo regulador ascendente. Métodos Se seleccionaron muestras de tejido tumoral y tejido adyacente a tumores de pacientes con cáncer de endometrio que fueron sometidos a resección quirúrgica en el Hospital Oncológico afiliado a la Universidad Médica de Shanxi desde enero de 2021 hasta diciembre de 2021, almacenadas en el biobanco del hospital. Se utilizó la reacción en cadena de la polimerasa inversa cuantitativa en tiempo real (RT-qPCR) para detectar los niveles de ARNm de PTK2 y analizar su correlación con las características clínico-patológicas de los pacientes. El estudio fue aprobado por el comité de ética del Hospital Oncológico afiliado a la Universidad Médica de Shanxi (JC2024036). Se detectó la expresión de PTK2 en células de cáncer de endometrio mediante RT-qPCR y Western blot. Se analizaron los niveles de expresión de PTK2 y su relación con el pronóstico de los pacientes a través de las bases de datos TIMER y The Human Protein Atlas (HPA). Se construyó un modelo de silenciamiento de PTK2 y se evaluó su impacto en la proliferación y migración celular utilizando el kit de conteo celular-8 (CCK-8) y experimentos transwell. La base de datos Ubibrowser predijo las posibles desubiquitinilasas de PTK2, y combinando bases de datos TIMER y GEPIA se seleccionó la peptidasa específica de ubiquitina 5 (ubiquitin-specific peptidase 5, USP5), analizando su correlación con la expresión de PTK2. Se estableció un modelo de silenciamiento de USP5, las células fueron tratadas con el inhibidor del proteasoma MG132, y se detectaron cambios en la expresión de PTK2. La regulación de PTK2 por USP5 fue verificada mediante co-inmunoprecipitación (Co-IP). Los experimentos de recuperación funcional evaluaron si USP5 influía en la proliferación y migración de células de cáncer de endometrio a través de PTK2. Además, a través de la base ENCORI se identificó el factor de iniciación de la traducción eucariota 4A3 (EIF4A3) y se analizó su correlación con la expresión de USP5. Se construyeron modelos de silenciamiento y sobreexpresión de EIF4A3 y se utilizó la actinomicina D para evaluar su efecto regulador sobre USP5. Resultados Se incluyeron 29 pacientes; PTK2 mostró sobreexpresión en tejido tumoral y celular (P<0.05) y se asoció con una reducción de la supervivencia global (log-rank P<0.05). El silenciamiento de PTK2 inhibió la proliferación y migración de células de cáncer de endometrio (P<0.05). USP5 y PTK2 mostraron correlación positiva (P<0.05). El silenciamiento de USP5 no afectó la expresión de ARNm de PTK2, pero disminuyó el nivel proteico (P<0.05), efecto revertido por MG132; Co-IP confirmó que el silenciamiento de USP5 incrementó el nivel de ubiquitinación de PTK2. Los experimentos de recuperación funcional demostraron que la sobreexpresión de USP5 aumentaba PTK2 y promovía la proliferación y migración, y el silenciamiento de PTK2 revertía este efecto (P<0.05); inversamente, el silenciamiento de USP5 disminuía PTK2 e inhibía la proliferación y migración, y la sobreexpresión de PTK2 revertía este efecto (P<0.05). La proteína de unión a ARN EIF4A3 interactúa con USP5 y su expresión está positivamente correlacionada. El experimento con actinomicina D mostró que EIF4A3 prolonga la vida media del ARNm de USP5 (P<0.05), y Western blot confirmó la regulación positiva de EIF4A3 sobre el nivel proteico de USP5 (P<0.05). Conclusión PTK2 está sobreexpresado en cáncer de endometrio y se asocia con un mal pronóstico del paciente, siendo la molécula clave que media la función oncogénica de USP5. EIF4A3 regula positivamente USP5 mediante la estabilización del ARNm. Este estudio revela el papel del eje de señalización EIF4A3/USP5/PTK2 en el cáncer de endometrio y proporciona nuevos objetivos para la terapia molecular dirigida.

cáncer de endometrio;PTK2;USP5;EIF4A3;proliferación celular;migración celular