中国癌症杂志 ›› 2018, Vol. 28 ›› Issue (3): 184-190.doi: 10.19401/j.cnki.1007-3639.2018.03.003
杨丽娜1,杨宇琦1,杨 恭2,3,陈亚萍1
YANG Lina1, YANG Yuqi1, YANG Gong2,3, CHEN Yaping1
摘要: 背景与目的:极光激酶A(Aurora A kinase,Aurora A)属于丝/苏氨酸蛋白激酶家族中的一员,可促进卵巢癌的化疗抵抗。活性氧(reactive oxygen species,ROS)由机体正常代谢产生,参与细胞信号转导过程。肿瘤细胞由于代谢旺盛及细胞内氧化还原体系的失衡,ROS水平高于正常细胞。并且耐药细胞株中ROS水平降低,提示ROS在肿瘤耐药中发挥作用。该研究旨在探讨ROS在Aurora A介导顺铂化疗耐药中的作用。方法:采用二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯(2’, 7’-dichlorofluorescin diacetate,DCFH-DA)法检测人卵巢癌细胞株A2780和顺铂耐药株A2780/CDDP中ROS的水平,采用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测顺铂的半数抑制浓度(50% inhibitory concentration,IC50);构建Aurora A过表达和沉默细胞株,检测细胞内ROS水平;加入ROS清除剂N-乙酰-L-半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC),检测顺铂的IC50;采用蛋白[质]印迹法(Western blot)检测相关信号通路,探讨可能的分子机制。结果:顺铂耐药株中ROS水平低于对照细胞株。加入NAC降低细胞内ROS可增强细胞对顺铂的耐药性。Aurora A过表达,细胞内ROS水平下降,可增强细胞对顺铂的耐药;而Aurora A沉默后,细胞内ROS升高,则可提高细胞对顺铂的敏感性。Aurora A过表达,促进AMP活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)的磷酸化及糖酵解。结论:Aurora A可能通过促进AMPK磷酸化及糖酵解过程,降低细胞内ROS水平,从而增强卵巢癌细胞对顺铂的耐药性。