中国癌症杂志 ›› 2013, Vol. 23 ›› Issue (6): 439-446.doi: 10.3969/j.issn.1007-3969.2013.06.007
刘明艳,张虹
LIU Ming-yan, ZHANG Hong
摘要:
背景与目的:肿瘤细胞多药耐药性的产生是卵巢癌化疗失败的主要原因之一,Sorcin被发现在多种耐药肿瘤细胞中过度表达,可作为逆转肿瘤细胞多药耐药性(multi-dncg resistance,MDR)的靶点。本研究探讨Sorcin沉默表达对逆转人卵巢癌耐药细胞SKOV3/CDDP耐药性的作用及机制。方法:构建Sorcin稳定沉默SKOV3/CDDP细胞系后,采用MTS、流式细胞术、蛋白质印迹法(Western blot)、RT-PCR及荧光报告质粒等方法,观察肿瘤细胞药物敏感性、细胞内罗丹明123含量、细胞凋亡率、细胞周期的变化,MDR基因(multi-drug resistance gene,MDR1)、MDR相关蛋白(multi-drug resistance-associated protein,MRP1)、Survivin及Bcl-2 mRNA及蛋白水平表达的变化,Akt磷酸化水平及NF-κB转录活性的变化。结果:Sh-Sorcin-1和Sh-Sorcin-2沉默Sorcin表达可提高SKOV3/CDDP细胞对顺铂的敏感性,提高肿瘤细胞凋亡率并将细胞周期阻滞在G2/M期,Sh-Sorcin-1和Sh-Sorcin-2肿瘤细胞中罗丹明123含量相比未转染对照组分别提高了1.64倍和2.46倍,MDR1、MRP1、Survivin及Bcl-2蛋白表达显著下降,MDR1 mRNA表达分别是未转染对照组的42.3%和26.5%,MRP1 mRNA表达分别是对照组的33.2%和18.9%,Survivin mRNA表达分别是未转染对照组的36.2%和29.6%,Bcl-2 mRNA表达分别是未转染对照组的54.6%和46.7%,Akt磷酸化水平显著下降,NF-κB转录活性分别是未转染对照组的56.3%和38.4%。结论:抑制Sorcin表达可逆转SKOV3/CDDP细胞MDR性,提高肿瘤细胞药物敏感性,其机制可能与降低细胞Akt磷酸化水平、降低NF-κB活性有关。