中国癌症杂志 ›› 2015, Vol. 25 ›› Issue (7): 516-521.doi: 10.3969/j.issn.1007-3969.2015.07.005
毛英,陈保华,李新建,姚斌
MAO Ying, CHEN Baohua, LI Xinjian, YAO Bin
摘要: 背景与目的:miR-224在肝细胞癌中呈过表达,并参与癌症的侵袭与转移过程,该研究通过观察miR-224体内、外对Hep3B细胞增殖和凋亡的影响,探讨miRNA-224与肝细胞癌发生、发展之间的关系。方法:运用实时荧光定量PCR定量分析miR-224反义寡核酸技术(antisense oligonucleotide,ASO)对Hep3B细胞mRNA表达的影响;通过miR-224 ASO降低Hep3B细胞中miR-224的表达,采用MTT、克隆形成实验、流式细胞术及体内实验观察miR-224 ASO对Hep3B细胞产生的生物学效应。结果:Hep3B细胞miR-224 ASO转染组与对照组相比,miR-224水平明显下降(P<0.05);MTT实验结果显示转染miR-224 ASO后,Hep3B细胞的存活数量明显低于对照组(P<0.05);克隆形成实验结果显示miR-224 ASO组克隆形成率较对照组显著降低(P<0.05);体内研究进一步证实miR-224 ASO可以抑制肿瘤细胞的增殖,从而导致肿瘤生长较对照组慢(P<0.05),肿瘤的体积较对照组明显减小(P<0.05);流式细胞术检测结果显示,转染miR-224 ASO组较对照组细胞凋亡明显增加(P<0.05);另外,降低miR-224的表达后发现Bcl-2的mRNA和蛋白都明显下降。结论:miR-224在Hep3B细胞中表达上调,降低miR-224的表达可有效抑制Hep3B细胞生长、促进细胞凋亡。miR-224有可能成为肝细胞癌表达调控的新靶点。