中国癌症杂志 ›› 2015, Vol. 25 ›› Issue (10): 791-795.doi: 10.3969/j.issn.1007-3969.2015.10.006
胡可可,邓赫男,谭 琛,彭丽秀,肖斌梅
HU Keke, DENG Henan, TAN Chen, PENG Lixiu, XIAO Binmei
摘要: 背景与目的:miR-101在胃癌、结肠癌、乳腺癌以及前列腺癌中表达下调,有类似抑癌基因样作用,然而,其在卵巢癌中的作用尚未明确。该研究旨在探讨miR-101是否通过靶向调控甲基化转移酶3A(DNMT3A)抑制人卵巢癌细胞生长与侵袭,从而进一步揭示miR-101的抑瘤机制。方法:采用实时定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测22例卵巢癌组织及癌旁正常卵巢组织中miR-101的表达改变;将miR-101 mimics转染于卵巢癌SKOV3细胞,以DNMT3A siRNA为阳性对照,采用蛋白[质]印迹法(Western blot)检测外源过表达miR-101对DNMT3A蛋白表达水平的影响;采用噻唑蓝(thiazolyl blue,MTT)和Transwell侵袭实验检测外源高表达miR-101对人卵巢癌细胞生长与侵袭能力的影响。结果:qRT-PCR检测结果显示,miR-101在22例卵巢癌组织中的表达水平较癌旁正常组织明显下调;Western blot检测结果显示,外源过表达miR-101或沉默DNMT3A能下调SKOV3细胞DNMT3A蛋白的表达水平;MTT检测结果显示,转染miR-101 mimics或沉默DNMT3A 48、72和96 h后D值与对照组比较明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05);Transwell侵袭实验显示,转染miR-101 mimics或沉默DNMT3A 36 h后穿过基底膜的细胞数分别为(105±7)个和(107±13)个,与对照组(213±11)个比较能明显减缓SKOV3细胞的穿膜能力,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-101通过靶向调控DNMT3A抑制人卵巢癌细胞生长与侵袭。