中国癌症杂志 ›› 2016, Vol. 26 ›› Issue (3): 238-244.doi: 10.3969/j.issn.1007-3969.2016.03.006
阚岩岩1,张建华1,周 敏1,章龙珍2,王 侠2
KAN Yanyan1, ZHANG Jianhua1, ZHOU Min1, ZHANG Longzhen2, WANG Xia2
摘要: 背景与目的:Rab11基因在宫颈癌细胞中高表达,可能与细胞恶性转化相关。本研究采用RNA干扰技术下调Rab11基因表达,并探讨其对宫颈癌HeLa/SiHa细胞侵袭迁移的影响及可能的相关机制。方法:将HeLa/SiHa细胞分为2组:阴性对照组(转染阴性对照的小干扰RNA)和Rab11 siRNA干扰组(转染小干扰Rab11siRNA)。蛋白[质]印迹法(Western blot)检测Rab11干扰效果,检测转染Rab11 siRNA后,侵袭相关蛋白Rac1、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP2)和MMP9表达的变化;细胞划痕损伤实验检测细胞迁移;Transwell实验检测细胞侵袭;细胞免疫荧光实验从形态学角度探索在小干扰Rab11后Rac1蛋白在细胞膜上聚集位置的变化。结果:转染小干扰Rab11siRNA到HeLa/SiHa细胞后,Rab11蛋白表达受到高效抑制(P<0.01);细胞迁移、侵袭能力受到抑制(P<0.05),Rac1蛋白表达明显下调(P<0.01),MMP2、MMP9蛋白表达下调(P<0.05),Rab11 siRNA处理组细胞运动前端细胞膜下Rac1蛋白聚集量减少。结论:Rab11基因表达下调可以抑制HeLa/SiHa细胞的迁移和侵袭,其机制可能与Rac1、MMP2和MMP9蛋白表达量下降及Rac1定位的改变有关。