中国癌症杂志 ›› 2015, Vol. 25 ›› Issue (10): 785-790.doi: 10.3969/j.issn.1007-3969.2015.10.005
刘 红1,王玉净2,边 磊2,黎海莉2,房朝晖1,吴小华3,程建新2
LIU Hong1, WANG Yujing2, BIAN Lei2, LI Haili2, FANG Zhaohui1, WU Xiaohua3, CHENG Jianxin2
摘要: 背景与目的:肿瘤干细胞的存在是肿瘤细胞抗拒化疗的原因之一。该研究探讨CD44+/CD24+宫颈癌Siha细胞对顺铂的耐药性及相关机制。方法:体外培养Siha细胞,流式荧光激活细胞分选仪分选CD44+/CD24+Siha细胞,噻唑蓝(thiazolyl blue,MTT)法检测不同浓度顺铂对细胞的体外抑制情况,采用流式细胞仪检测10 μg/mL顺铂作用于CD44+/CD24+ Siha细胞24、48和72 h时的细胞凋亡率,实时定量聚合酶链式反应(quantitutive real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)和蛋白[质]印迹法(Western blot)检测CD44+/CD24+ Siha细胞中Oct-4、ABCG2、Bcl-2的表达,同时设立亲代Siha细胞作为对照。结果:不同浓度顺铂(0.1、1、5、10、15和20 μg/mL)对CD44+/CD24+ Siha细胞的增殖抑制作用较亲代Siha细胞小[(88.4±1.5)% vs (92.9±1.5)%,(79.9±1.0)% vs (84.7±1.1)%,(69. 8±0.8)% vs (75.1±2.9)%,(59.0±0.7)% vs (65.8±2.7)%,(49.6±0.9)% vs(52.1±0.5)%,(45.1±0.7)% vs (48.8±1.0)%,P<0.05];与亲代细胞相比,当10 μg/mL顺铂作用于CD44+/CD24+Siha细胞时,发现在24、48和72 h时的细胞凋亡率均较小[(3.05±0.16)% vs (5.17±0.27)%,(17.94±2.02)%vs (32.60±4.28)%和(40.14±3.01)% vs (56.62±5.32)%,P<0.05]。qRT-PCR和Western blot实验均显示CD44+/CD24+ Siha细胞高表达Oct-4、ABCG2和Bcl-2,与亲代Siha细胞比较差异有统计学意义(P=0.015)。结论:CD44+/CD24+ Siha细胞可以抵抗顺铂诱导的细胞凋亡,具有化疗抵抗性,并且高表达肿瘤干细胞表面标志物如Oct-4和ABCG2,该结果在宫颈癌肿瘤干细胞的有效分选以及肿瘤靶向治疗方面有深远意义。