中国癌症杂志 ›› 2021, Vol. 31 ›› Issue (11): 1050-1057.doi: 10.19401/j.cnki.1007-3639.2021.11.002
石万红 1 ,邹 雷 1 ,康 强 2 ,王峻峰 3 ,白建华 1 ,晋 云 3 ,张 杰 1 ,张小文 2
SHI Wanhong 1 , ZOU Lei 1 , KANG Qiang 2 , WANG Junfeng 3 , BAI Jianhua 1 , JIN Yun 3 , ZHANG Jie 1 , ZHANG Xiaowen 2
摘要: 背景与目的:研究表明,与肥胖症密切相关的源自脂肪细胞的细胞因子瘦素(leptin)在癌变和肿瘤发生中起着重要作用。通过体外实验观察leptin对人胆囊癌细胞系GBC-SD和OCUG侵袭和迁移能力的影响,探讨其可能的作用机制。方法:将胆囊癌GBC-SD和OCUG细胞分为对照组和实验组。实验组利用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)技术靶向沉默胆囊癌GBC-SD和OCUG细胞的leptin表达,应用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测转染效率,通过细胞划痕实验和transwell小室法检测胆囊癌GBC-SD和OCUG细胞的迁移和侵袭能力,采用免疫荧光和免疫细胞化学实验检测siRNA干扰后胆囊癌GBC-SD和OCUG细胞的leptin蛋白水平,利用蛋白质印迹法(Western blot)检测干扰后GBC-SD和OCUG细胞的leptin和p-AKT蛋白表达。结果:细胞划痕实验结果显示,利用siRNA靶向沉默leptin后GBC-SD和OCUG细胞的迁移能力下降(t=26.614,P < 0.01;t=19.338,P < 0.01)。Transwell迁移实验结果显示,利用siRNA靶向沉默leptin后GBC-SD和OCUG细胞的迁移能力也下降(t=7.185,P=0.002;t=8.889,P=0.003)。Transwell侵袭实验结果显示,干扰后GBC-SD和OCUG细胞的侵袭能力下降(t=10.183,P=0.001;t=9.697,P=0.001)。免疫荧光和免疫细胞化学实验结果显示,干扰后GBC-SD和OCUG细胞的leptin蛋白表达下降,Westernblot检测结果表明,靶向沉默GBC-SD细胞后leptin和p-AKT蛋白表达下调(t=26.463,P < 0.01;t=13.904,P < 0.01),靶向沉默OCUG细胞后leptin和p-AKT蛋白表达也下调(t=21.335,P < 0.01;t=17.914,P < 0.01)。结论:下调GBC-SD和OCUG细胞的leptin表达可抑制细胞侵袭和转移能力,并可能通过AKT信号通路调控胆囊癌细胞的侵袭和迁移。Leptin有望成为胆囊癌治疗的一个重要靶点。