中国癌症杂志 ›› 2016, Vol. 26 ›› Issue (10): 820-825.doi: 10.19401/j.cnki.1007-3639.2016.10.003
李勇杰1,于庆龙1,潘际刚1,王宏健1,宛 蕾2,王旭东1
LI Yongjie1, YU Qinglong1, PAN Jigang1, WANG Hongjian1, WAN Lei2, WANG Xudong1
摘要: 背景与目的:酒精(ethyl alcohol,EtOH)可促进乳腺癌的恶性演进,但其信号机制尚未完全明了。本研究通过观察EtOH对乳腺癌细胞钙激活中性蛋白酶(calcium-activated neutral protease,CANP)-周期蛋白E/局部黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)信号通路和细胞迁移的影响,以及表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)在其中的介导作用,探讨EtOH促进乳腺癌细胞迁移的信号机制。方法:以人乳腺肿瘤细胞系MCF-7为模型细胞(MCF-10A乳腺上皮细胞为对照);采用蛋白[质]印迹法(Western blot)分析周期蛋白E和FAK蛋白剪切反应;通过伤口愈合实验观察细胞迁移效应;采用EGFR抑制剂(EGFR inhibitor,EGFR-I)或CANP抑制剂Calpeptin抑制EGFR或CANP活性,观察抑制剂对EtOH诱导CANP1大亚基、周期蛋白E/FAK蛋白剪切及细胞迁移的影响。结果:以EtOH(0.3%)处理模型细胞可观察到周期蛋白E和FAK出现明显蛋白剪切且该效应呈剂量和时间依赖性,还观察到EtOH刺激细胞迁移活动(+47.30%,P<0.05),但EtOH对MCF-10A细胞迁移无明显影响;以Calpeptin(10 μmol/L)预处理模型细胞,可见EtOH(0.3%)或EGF(10 ng/mL)诱导的周期蛋白E/FAK蛋白剪切效应受到明显抑制;EGFR-I(3 μmol/L)可显著抑制EtOH诱导的CANP1大亚基和周期蛋白E/FAK蛋白剪切及细胞迁移效应(-53.00%,P<0.01)。结论:EtOH可通过EGFR激活乳腺癌细胞CANP信号活动并促进细胞迁移,EGFR-CANP通路参与介导EtOH与EGF之间的串话,提示EGFR-CANP信号通路中的关键分子可为防止乳腺癌转移的潜在药物靶点。