中国癌症杂志 ›› 2017, Vol. 27 ›› Issue (3): 161-168.doi: 10.19401/j.cnki.1007-3639.2017.03.001
张 飒,许佳慧,柳素玲,李大强
ZHANG Sa, XU Jiahui, LIU Suling, LI Daqiang
摘要: 背景与目的:染色质重塑蛋白MORC家族CW型锌指结构蛋白2(microrchidia family CW-type zinc finger 2, MORC2)在DNA介导的基因转录及DNA损伤修复等基本生物学过程中发挥重要作用,但其对乳腺癌细胞生物学行为的影响目前尚无相关报道。乙醛脱氢酶(aldehyde dehydrogenase,ALDH)家族成员ALDH1A3(aldehyde dehydrogenase family 1 member A3,ALDH1A3)是一种公认的乳腺癌干细胞的标志物,但其在乳腺癌细胞中的调控机制目前尚不清楚。该研究拟探讨敲低MORC2基因对ALDH1A3表达以及对乳腺癌细胞干性的影响。方法:利用短发夹RNA (short hairpin RNA,shRNA) 介导的基因沉默方法构建稳定敲低MORC2基因的乳腺癌细胞系;利用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白[质]印迹法(Western blot)分析敲低MORC2基因对ALDH1A3表达的影响;利用微球体形成实验和流式细胞荧光分选技术(fluorescence activated cell sorting, FACS)分析敲低MORC2对乳腺癌干细胞亚群的影响。结果:Western blot和RTFQ-PCR分析结果显示,敲低MORC2基因显著下调ALDH1A3蛋白及mRNA水平;微球体形成实验显示敲低MORC2基因显著抑制MCF-7细胞的成球能力;FACS分析显示敲低MORC2基因显著下调ALDH1A3阳性乳腺癌干细胞亚群, 而对CD44+CD24-乳腺癌干细胞亚群没有明显影响。结论:MORC2通过调节ALDH1A3的表达促进乳腺癌干细胞表型。