蛋白激酶CβⅡ通过IL-6自分泌途径促进肝细胞癌侵袭的研究

doi:10.19401/j.cnki.1007-3639.2021.04.005

中国癌症杂志 ›› 2021, Vol. 31 ›› Issue (4): 268-276.doi: 10.19401/j.cnki.1007-3639.2021.04.005

蛋白激酶CβⅡ通过IL-6自分泌途径促进肝细胞癌侵袭的研究

刘　敏 ^1,2 ，陈添亮 ³ ，郭　娟 ⁴，伊雪 ^1,2 ，高洪泉¹ ，巫佳翠¹ ，王玉孝¹

1. 厦门医学院基础医学部，福建厦门 361023 ；
2. 机能与临床转化福建省高等学校重点实验室，福建厦门 361023 ；
3. 厦门医学院临床医学系，福建厦门 361023 ；
4. 厦门医学院附属第二医院病理科，福建厦门 361023

出版日期:2021-04-30 发布日期:2021-04-29
通信作者: 王玉孝 E-mail: 1010531340@qq.com
基金资助:
福建省教育厅中青年教师教育科研项目（JAT170712）；福建省大学生创新训练项目（201812631006）；厦门医学院呼吸疾病研究所课题（HXJB-03）。

Protein kinase Cβ Ⅱ promotes invasion of hepatocellular carcinoma by modulating autocrine of IL-6

LIU Min ^1,2 , CHEN Tianliang ³ , GUO Juan ⁴ , YI Xue ^1,2 , GAO Hongquan ¹ , WU Jiacui ¹ , WANG Yuxiao ¹

1. Department of Basic Medicine, Xiamen Medical College, Xiamen 361023, Fujian Province, China; 2. Key Laboratory of Functional and Clinical Translational Medicine, Xiamen 361023, Fujian Province, China; 3. Department of Clinical Medicine, Xiamen Medical College, Xiamen 361023, Fujian Province, China; 4. Department of Pathology, the Second Affiliated Hospital of Xiamen Medical College, Xiamen 361023, Fujian Province, China

Published:2021-04-30 Online:2021-04-29
Contact: WANG Yuxiao E-mail: 1010531340@qq.com

摘要/Abstract

摘要： 背景与目的：肿瘤微环境中存在的炎性因子参与肿瘤的生长及转移，蛋白激酶CβⅡ（protein kinase CβⅡ，PKCβⅡ）能否通过调节炎性因子参与肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）的侵袭尚不清楚。研究PKCβⅡ对HCC侵袭的作用及相关机制，深入探讨PKCβⅡ与肿瘤炎性微环境之间的关系。方法：收集PKCβⅡ高表达细胞的条件培养基处理HCC细胞，采用transwell法检测细胞的侵袭情况，采用细胞因子抗体芯片检测上清液中细胞因子的变化，采用酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）和实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction，RTFQ-PCR）检测PKCβⅡ高表达对白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）上清液中含量及转录的影响，采用transwell法检测IL-6中和抗体及IL-6受体（IL-6 receptor，IL-6R）中和抗体对PKCβⅡ高表达诱导HCC细胞侵袭的影响，采用Western blot检测信号转导与转录激活因子3（signal transducer and activator of transcription 3，STAT3）、P-STAT3的蛋白表达，采用非参数Spearman检验分析HCC组织中PKCβⅡ和IL-6表达的相关性。结果：采用PKCβⅡ高表达细胞的条件培养基处理可以提高HCC细胞Huh7（P<0.01）和Hep3B（P<0.05）的侵袭能力；PKCβⅡ高表达显著提高上清液中IL-6的含量（P<0.01）及IL-6的转录（P<0.01）；IL-6中和抗体及IL-6R中和抗体均可以抑制PKCβⅡ介导的HCC细胞侵袭能力的增加（P<0.01），P-STAT3蛋白表达升高（P<0.05）；HCC组织中PKCβⅡ和IL-6的表达呈正相关（r=0.697，P<0.01）。结论：PKCβⅡ通过IL-6自分泌途径促进HCC细胞的侵袭。

关键词: 蛋白激酶C βⅡ, IL-6, 自分泌, 肝细胞癌, 侵袭

Abstract: Background and purpose: Multiple proinflammatory cytokines in tumorigenic microenvironment are involved in the acquired capability for invasive growth and metastasis. It is not clear whether protein kinase CβⅡ(PKCβⅡ) can modulate the secretion of proinflammatory cytokines to promote the progression of hepatocellular carcinoma (HCC). This study aimed to explore the function and mechanism of PKCβⅡ in the invasion of HCC to investigate the relationship between PKCβⅡ and tumor inflammatory microenvironment. Methods: The effect of conditioned medium from PKCβⅡ-overexpressing cells on the invasion of HCC cells was detected by the transwell assay. Serum-free culture supernatants were analyzed by cytokine arrays. The effect of PKCβⅡ overexpression on the expression of interleukin-6 (IL-6) in supernatants and at mRNA level was examined by enzyme- linked immunosorbent assay (ELISA) and real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction (RTFQ-PCR) respectively. The effects of IL-6 neutralizing antibody and IL-6 receptor (IL-6R) neutralizing antibody on PKCβⅡ overexpression-induced invasion of HCC cells were detected by the transwell assay. The expressions of signal transducer and activator of transcription 3 (STAT3) and P-STAT3 were detected by Western blot. Correlation of PKCβⅡ with the expression of IL-6 in clinical HCC cases was analyzed using the nonparametric Spearman test. Results: Conditioned medium obtained from PKCβⅡ-overexpressing cells significantly induced the invasiveness of Huh7 (P<0.01) and Hep3B (P<0.05), and the upregulated secretion of IL-6 (P<0.01) and mRNA level (P<0.01) upon PKCβⅡ overexpression were observed respectively. Administrations of IL-6 neutralizing antibody and IL-6R neutralizing antibody blocked PKCβⅡ overexpression-induced invasion of HCC cells (P<0.01). The protein level of P-STAT3 increased significantly upon PKCβⅡ overexpression (P<0.05). Immunohistochemical analysis also presented a strong positive correlation between PKCβⅡ and IL-6 expression in clinical HCC samples (r=0.697, P<0.01). Conclusion: PKCβⅡ promotes the invasion of HCC by modulating autocrine of IL-6.

Key words: Protein kinase CβⅡ, Interleukin-6, Autocrine, Hepatocellular carcinoma, Invasion

刘　敏, 陈添亮, 郭　娟, 伊雪, 高洪泉, 巫佳翠, 王玉孝 . 蛋白激酶CβⅡ通过IL-6自分泌途径促进肝细胞癌侵袭的研究[J]. 中国癌症杂志, 2021, 31(4): 268-276.

LIU Min , CHEN Tianliang , GUO Juan , YI Xue , GAO Hongquan , WU Jiacui , WANG Yuxiao . Protein kinase Cβ Ⅱ promotes invasion of hepatocellular carcinoma by modulating autocrine of IL-6[J]. China Oncology, 2021, 31(4): 268-276.

[1]	张学成, 关晓辉 . Circ_0007142吸附miR-647调控CCR8基因促进胃癌细胞的上皮-间质转化和侵袭[J]. 中国癌症杂志, 2021, 31(8): 714-724.
[2]	曹达龙, 朱文恺, 施国海, 张海梁, 王子良, 叶定伟. PRUNE2点突变影响前列腺癌DU145细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移[J]. 中国癌症杂志, 2021, 31(6): 441-446.
[3]	胡雅琼, 白　俊, 陈　琳, 陈新璐, 张丽萍, 周丹丹, 王　玉, 尹崇高, 李洪利, 刘雨清 . miR-625-5p通过靶向调控PRKACA促进肺腺癌细胞的增殖和侵袭[J]. 中国癌症杂志, 2021, 31(6): 447-454.
[4]	陈　杰, 王　嫣, 张维敏, 赵　笛, 张凌瑗, 詹启敏. 缺氧诱导食管鳞癌细胞中白细胞介素-7表达促进肿瘤进展[J]. 中国癌症杂志, 2021, 31(5): 361-367.
[5]	肖　锋, 肖静文, 邵建国, 陈丽燕, 顾春燕 . PD-1在肝细胞癌肿瘤浸润淋巴细胞中的表达及与预后的相关性[J]. 中国癌症杂志, 2021, 31(5): 419-427.
[6]	牛　娜, 林岩松 . ⁹⁰ Y微球选择性内放射治疗在肝细胞癌中的应用及研究进展[J]. 中国癌症杂志, 2021, 31(5): 428-434.
[7]	乔婷婷, 葛淑静, 罗　渊, 陆承荣, 段连宁 . H2AX磷酸化抑制肺癌细胞发生上皮-间质转化的作用机制[J]. 中国癌症杂志, 2021, 31(4): 277-284.
[8]	章　俊, 董宇华, 杨　叶, 张梦琪, 何　常 . Regorafenib联合TAS102新策略治疗肝细胞癌的研究[J]. 中国癌症杂志, 2021, 31(4): 294-301.
[9]	王春建 , 聂　刚 , 毛　艳 . TRIP6在乳腺癌中的作用及其机制研究[J]. 中国癌症杂志, 2021, 31(3): 161-169.
[10]	贺国洋, 陈庆庆, 邓美静, 王高翔, 王贝玺, 王永霞, 李　巍, 千新来, 朱会芳, . DIAPH3对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及分子机制[J]. 中国癌症杂志, 2021, 31(12): 1174-1184.
[11]	张进忠, 李悦淇, 石　科, 杨　亮, 郭　丹 . PLK4基因在人食管鳞癌组织中的表达及对癌细胞增殖、侵袭迁移影响的研究[J]. 中国癌症杂志, 2021, 31(12): 1185-1193.
[12]	黄　灵, 邹有瑞, 李琢琦, 马　悦, 高鑫义, 马　辉 . CHKA基因沉默对胶质瘤细胞生物学行为的影响及其机制[J]. 中国癌症杂志, 2021, 31(11): 1041-1049.
[13]	石万红, 邹　雷, 康　强, 王峻峰, 白建华, 晋　云, 张　杰, 张小文 . Leptin基因沉默对胆囊癌GBC-SD和OCUG细胞系侵袭和迁移能力的影响[J]. 中国癌症杂志, 2021, 31(11): 1050-1057.
[14]	张　欣, 周　成, 周恺乾, 柏乾明, 蒋冬先, 宿杰阿克苏, 侯英勇, 王　征, 纪　元 . 肉瘤样肝细胞癌中MET基因扩增与预后的相关性分析[J]. 中国癌症杂志, 2020, 30(9): 641-649.
[15]	徐珊珊 , 宋琴琴 , 仵红娇 , 付　宁 , 车玲玉 , 金　敏 , 刘　冲 , 韩素桂 , 张雪梅 , 张　志 . 膜辅助蛋白CD46 rs1970530遗传变异对肝癌发病风险的影响[J]. 中国癌症杂志, 2020, 30(9): 656-660.

蛋白激酶CβⅡ通过IL-6自分泌途径促进肝细胞癌侵袭的研究

Protein kinase Cβ Ⅱ promotes invasion of hepatocellular carcinoma by modulating autocrine of IL-6

PDF

可视化

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

参考文献

相关文章 15

编辑推荐

Metrics

本文评价